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固相萃取应用步骤说明

时间:2020-05-30     浏览:

1、固相萃取吸附剂与目的化合物之间的反应机理
固相萃取首要经过目的物与吸附剂之间的以下反应力来留样/吸附的
1)疏水效果力:如C18、C8、Silica、苯基柱等
2)离子交流效果:SAX, SCX,COOH、NH2
3)物理吸附:Florsil、Alumina等


2、pH值对固相萃取的影响
pH值能够改动方针物/吸附剂的离子化或质子化程度。关于强阳/阴离子交流柱来讲,因为吸附剂本身是彻底离子化的状况,方针物有必要彻底离子化才干够确保其被吸附剂彻底吸附保存。而方针物的离子化程度则与pH值有关。如关于弱碱性化合物来讲,其pH值有必要小于其pKa值两个单位才干够确保方针物彻底离子化,而关于弱酸性化合物,其pH值有必要大于其pKa值两个单位才干确保其彻底离子化。关于弱阴/阳离子交流柱来讲,有必要要确保吸附剂彻底离子化才确保方针物的彻底吸附,而溶液的pH值有必要满意必定的条件才干确保其彻底离子化。
3、固相萃取操作进程及留意事项
对于填料保存机理的不一样(填料保存方针化合物或保存杂质),操作稍有不一样。

1)填料保存方针化合物
固相萃取操作一般有四步
Ø 活化----除掉小柱内的杂质并发明必定的溶剂环境。(留意整个进程不要使小柱干枯)
Ø 上样----将样品用必定的溶剂溶解,转移入柱并使组分保存在柱上。(留意流速不要过快,以1ml/min为宜,最大不超越5ml/min)
Ø 淋洗----最大程度除掉搅扰物。(主张此进程完毕后把小柱彻底抽干)
Ø 洗脱----用小体积的溶剂将被测物质洗脱下来并收集。(留意流速不要过快,以1ml/min为宜)

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